Small RNA测序简介
Small RNA是生命活动重要的调控因子，几乎存在于所有的生物体中，包括：microRNA、ncRNA、siRNA、snoRNA、piRNA、rasiRNA等。它们分别在转录水平、转录后水平及表观遗传水平等方面控制基因的表达，组成RNA 调控网络，通过调控包括细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理进程，来影响生物体的生长发育，并与多种人类疾病的发生密切相关。
第二代高通量测序技术，可以在没有生物体基因组参考序列信息的前提下，，从而快速全面检测小分子RNA，具体而言，通过RNA样品提取纯化、page凝胶电泳分离出目标大小RNA、RT-PCR扩增、cDNA文库建立、高通量测序和数分析等步骤一次性获得数百万条小分子RNA序列，用于新的小分子RNA发现，或小分子RNA表达谱研究。
华因康Small RNA测序技术
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采用Pstar系列高通量基因测序仪
技术特点
- 连接测序法，准确率高达99.9%；
- 可根据客户需求，设计实验方案；
- 时间周期：14~30个工作日。
技术路线
- 样品RNA提取；
- RNA大小选择；
- 经反转录合成成为双链cDNA；
- cDNA加上两端接头建成DNA文库；
- E-PCR扩增后，使用Pstar II测序仪进行测序。
样品要求
1、组织材料：
细胞（≥106 个）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等。
2、RNA：
浓度≥750ng/μl，质量≥20 μg，OD260/280:2.0-2.2，并确保RNA无降解，无污染；或提供浓度≥20ng/μl，总量≥200ng的Small RNA样品（提取总RNA时，请避免使用过柱法和LiCL沉淀，以免Small RNA的丢失）。
请提供基因组RNA样品的体积、浓度、制备时间、溶剂名称及来源等具体信息。同时请附上相关QC数据，包括电泳胶图、分光光度或Nanodrop仪器检测数据。样品保存期间切忌反复冻融，送样时使用干冰运输。